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雷莉妍,王瑞成,周 瑞,唐志书.基于NF-κB通路的芒果苷干预脂多糖诱导的细胞炎症作用机制研究[J].中国中西医结合杂志,2019,39(5):597-602
基于NF-κB通路的芒果苷干预脂多糖诱导的细胞炎症作用机制研究
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DOI:10.7661/j.cjim.20190116.096
中文关键词:  芒果苷  脂多糖  炎症  核因子κB通路
英文关键词:
基金项目:国家自然科学基金资助项目(No. 81603357); 陕西省自然科学基础研究项目(No. 2017JQ8043); 陕西省教育厅科研基金项目(No. 16JK1222); 陕西中医药大学科研基金项目(No. 2017QN21)
作者单位E-mail
雷莉妍 陕西省中药资源产业化协同创新中心 陕西省中药基础与新药研究重点实验室 (陕西712083) liyanlei-2005@163.com 
王瑞成,周 瑞,唐志书   
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中文摘要:
      目的 研究芒果苷对小鼠巨噬细胞RAW 264.7的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用脂多糖(LPS)诱导RAW 264.7细胞炎症模型。实验分四步:(1)细胞存活率实验分5组,即:空白组、LPS组、LPS+不同浓度(50、100、150 μg/mL)芒果苷组。MTT法检测细胞存活率。(2)一氧化氮(NO)、白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白介素6(IL-6)分泌实验分6组,即:空白组、LPS组、LPS和不同浓度芒果苷(50、100、150 μg/mL)组、LPS+BAY 11-7082[核因子κB(NF-κB)抑制剂]组。Griess法检测NO分泌量,ELISA法检测IL-1β、TNF-α及IL-6分泌量。(3)诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与环氧化酶-2(COX-2)mRNA及蛋白表达实验分组同细胞存活率实验。实时荧光定量PCR检测iNOS及COX-2 mRNA水平变化,Western blot检测iNOS及COX-2蛋白表达水平。(4)细胞质、细胞核中NF-κB表达实验分3组,即:空白组、LPS组、LPS+150 μg/mL(终末浓度)芒果苷共处理组, Western blot检测细胞质、细胞核中NF-κB p65蛋白表达量。结果 (1)与空白组比较,LPS组显著降低RAW264.7细胞存活率(P<0.05);与LPS组比较,50~150 μg/mL芒果苷预处理对 RAW264.7细胞增殖无显著影响(P>0.05)。(2)与空白组比较,LPS组NO、IL-1β、TNF-α、IL-6分泌量显著升高 (P<0.05);与LPS组比较,除50 μg/mL芒果苷预处理组NO、TNF-α分泌量无显著变化外 (P>0.05),其余各组NO、IL-1β、TNF-α、IL-6分泌量均显著降低(P<0.05)。(3)与空白组比较,LPS组iNOS、COX-2 mRNA及蛋白表达量均显著升高(P<0.05);与LPS组比较,50~150 μg/mL芒果苷预处理组iNOS、COX-2 mRNA及蛋白表达显著下降(P<0.05)。(4)与空白组比较,LPS组细胞质中NF-κB p65蛋白量减少,细胞核中则增多(P<0.05);与LPS组比较,150 μg/mL芒果苷预处理组细胞质中NF-κB p65蛋白量升高,细胞核中蛋白量减少(P<0.05)。结论 芒果苷可能通过抑制NF-κB信号通路,而抑制iNOS、COX-2表达及相关炎症因子的分泌,干预LPS诱导的RAW264.7细胞炎症。
英文摘要:
      
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