平喘方对哮喘小鼠NF-κB信号通路的调控及对TLR4 mRNA和蛋白表达的影响

目的?研究平喘方通过调节核因子-κB（NF-κB）信号通路对哮喘小鼠的作用及其对 Toll样受体4（TLR4）mRNA和蛋白表达的影响。方法?将60只SPF级雄性Balb/c小鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组、平喘方组，每组15只。除空白组外，其余组均采用先卵清蛋白（OVA）+氢氧化铝凝胶[Al（OH）3]腹腔注射致敏，采用OVA雾化激发的方法来建立哮喘模型。地塞米松组、平喘方组分别予0.075 mg/mL地塞米松溶液、5.33 g/mL平喘方灌胃治疗1周，空白组、模型组给予等量生理盐水灌胃。末次给药24 h后，采用HE、Masson染色观察肺组织病理变化，ELISA法检测肺泡灌洗液（BALF）白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）浓度，Western Blot观察肺组织中NF-κB亚单位（p65）、NF-κB的抑制蛋白（IκBα）、TLR4、髓样分化因子（MyD88）蛋白表达，RT-PCR法观察p65、IκBα、TLR4、MyD88 mRNA水平。结果?HE及Masson染色可见模型组小鼠肺组织明显炎症细胞浸润，上皮基底膜增厚，胶原纤维增多，平喘方组小鼠肺部炎性细胞浸润明显减轻，胶原纤维面积减小；与空白组比较，模型组小鼠BALF中IL-6、TNF-α浓度，肺组织中p65、MyD88蛋白表达及mRNA水平，气管中TLR4 mRNA及蛋白表达水平均升高（均P<0.01），IκBα蛋白表达及mRNA水平降低（P<0.01）；与模型组比较，地塞米松组和平喘方组BALF中IL-6、TNF-α浓度均降低，MyD88、p65、TLR4蛋白表达及mRNA水平下调（P<0.01，P<0.05），地塞米松组IκBα蛋白表达及mRNA水平升高（均P<0.01），平喘方组IκBαmRNA水平升高（P<0.01），IκBα蛋白表达上调，但差异无统计学意义（P>0.05）。与地塞米松组比较，平喘方组BALF中IL-6、TNF-α因子水平、p65 mRNA水平、TLR4 mRNA水平、MyD88蛋白表达及mRNA水平比较，差异无统计学意义（P>0.05），p65及 TLR4蛋白表达升高（P<0.05）。结论?平喘方对OVA诱导哮喘小鼠的气道炎症有较好的改善作用，其机制可能与降低TLR4及MyD88活性，调控NF-κB信号通路有关。

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