洋金花总碱对TGF-β1诱导的人肺腺癌细胞A549细胞EMT的影响

目的探讨洋金花总碱对人肺腺癌细胞株A549在体外经转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1， TGF-β1）诱导后发生上皮细胞间质化（epithelial-mesenchymal transition， EMT）的作用。方法将体外培养的A549 细胞随机分为5 组：空白对照组、TGF-β1组及低、中、高浓度药物组，分别作用24、48、72 h时，观察各组A549细胞形态变化，通过蛋白免疫印迹（Western blot）及实时荧光定量PCR（Real-time PCR）检测各组A549细胞人细胞角蛋白19（CK-19）及α－平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。结果 TGF-β1组的细胞形态逐渐由鹅卵石状向梭形改变；低、中、高浓度药物组形态与TGF-β1组相似； 3个浓度药物组细胞形态间比较，差异无统计学意义（ P >0.05）。Western blot结果显示：与空白对照组比较，TGF-β1组CK-19表达下调，α-SMA 表达上调（ P <0.01）；与TGF-β1组比较，低、中、高浓度药物组CK-19表达上调（ P <0.01），α-SMA 表达有所抑制（ P <0.01）；3个浓度药物组间比较，72 h时的高浓度药物组CK-19表达上调（ P <0.01），α-SMA 表达抑制（ P <0.01）。Real-time PCR结果显示：与TGF-β1组比较，3个浓度药物组细胞CK-19 mRNA表达增多；α-SMA mRNA表达减少（ P <0.01）。结论洋金花总碱对TGF-β1诱导的肺腺癌细胞A549 EMT形态改变无明显影响，能一定程度上逆转A549细胞EMT过程中特征性标记物CK-19及α-SMA的表达，使上皮标志物CK-19表达增多，间质细胞标志物α-SMA表达减少，且在作用72 h时的高浓度药物组最为明显，并呈浓度依赖性和时间依赖性。

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