健脾补肾、清肠化湿方对骨髓间充质干细胞增殖迁移的影响

基金项目:国家自然科学基金资助项目（No. 81403344， No.81373606）；国家中医药行业科研专项资助项目（No. 201407001）；国家中医药管理局项目（No. JDZX2012079）；江苏省临床医学科技专项（No. BL2014100）；江苏高校优势学科建设工程资助项目（No. PAPD）；国家中医临床研究基地（脾胃）资助项目

作者	单位	E-mail
朱磊,刘丽,顾培青
沈洪	南京中医药大学附属医院（江苏省中医院）脾胃病科（南京210029）	shenhong999@163.com

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中文摘要:

目的观察健脾补肾、清肠化湿方对骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells， BMSCs）增殖迁移的影响。方法贴壁筛选法体外分离培养BMSCs，制备细胞悬液，空白对照组不予任何药物干预，健脾补肾、清肠化湿方低、中、高剂量组（简称复方低、中、高剂量组）分别加入含有0.39、0.78、1.56 μg /mL复方共同孵育。采用CCK-8法检测BMSCs增殖能力；采用Transwell法检测BMSCs迁移趋化能力。另设复方各剂量组联合细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated protein kinase， ERK）激酶抑制剂U0126作为对照，采用Western blot法检测ERK和环磷腺苷效应元件结合蛋白（CAMP responsive element-binding protein， CREB）蛋白磷酸化水平。结果与空白对照组比较，复方低、中、高剂量组均能促进BMSCs增殖和BMSCs迁移数目增多（P<0.05），且复方中、高剂量组促BMSCs增殖作用优于复方低剂量组（P<0.05）。与空白对照组比较，复方各剂量组ERK和CREB蛋白磷酸化水平升高（P<0.05），且能被U0126抑制（P<0.01）；与复方低剂量组比较，复方中、高剂量组ERK磷酸化水平升高（P<0.05）。结论健脾补肾、清肠化湿方能促进BMSCs的增殖迁移，其机制可能与ERK/CREB信号通路有关。

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