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付丹丹,宋向凤,李占国,田中伟.白花蛇舌草提取物对表皮生长因子诱导的HaCaT细胞增殖、凋亡和TNF-α诱导的炎症因子影响[J].中国中西医结合杂志,2016,36(08):0975-980
白花蛇舌草提取物对表皮生长因子诱导的HaCaT细胞增殖、凋亡和TNF-α诱导的炎症因子影响
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DOI:10.7661/CJIM.2016.08.0975
中文关键词:  白花蛇舌草提取物  人永生化表皮细胞  增殖  凋亡  炎性因子
英文关键词:
基金项目:河南省教育厅科学技术研究重点项目(No. 13A320852);新乡市科技发展计划项目(No. 15SF26);河南省卫生科技创新型人才工程(No. 201004159);河南省医学科技攻关计划项目(No. 20150216)
作者单位E-mail
付丹丹,宋向凤,李占国   
田中伟 河南省新乡医学院第一附属医院皮肤性病科(河南453100) zhonwt@163.com 
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中文摘要:
      目的观察白花蛇舌草提取物(Hedyotis diffusa extract,HDE)对HaCaT细胞增殖、凋亡和炎症因子的影响,并探究可能的分子机理。方法实验分为3组:空白组不加表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和HDE处理,对照组只加EGF而不加HDE处理,白花蛇舌草组分别用25、50、100 mg/mL HDE和EGF共培养。CCK-8法检测HaCaT细胞增殖情况,流式细胞仪检测HaCaT细胞生长周期和凋亡率,Western blot法测定Ki67、Bcl-xL、cIAP1、procaspase-3、cleaved caspase-3的蛋白表达,ELISA法检测HaCaT细胞培养基上清液中IL-6、IL-8、IL-10的浓度,Western blot检测NF-κB p65亚基磷酸化(p-p65)水平。结果与空白组比较,对照组HaCaT细胞吸光度及Ki67蛋白表达升高(P<0.05, P<0.01),p-p65、IL-6、IL-8水平升高(P<0.05, P<0. 01),IL-10水平降低(P<0.01);与对照组比较,白花舌草组25、50、 100 mg/mL浓度时HaCaT细胞吸光度及Ki67蛋白表达降低(P<0.05, P<0.01),p-p65、IL-6、IL-8水平降低, IL-10水平升高(P<0.05, P<0. 01);同时白花蛇舌草组各浓度组凋亡率较对照组增加(P<0.05, P<0.01)。对照组处于G1期的细胞数量百分比为52.85%,白花蛇舌草组25、50、100 mg/mL浓度时分别是58.51%、73.12%和79.95%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05, P<0.01)。与白花蛇舌草组25 mg/mL比较,白花蛇舌草组50和100 mg/mL处于G1期的细胞数量百分比及凋亡率升高(P<0.01),且白花蛇舌草组100 mg/mL时处于G1期的细胞数量百分比及凋亡率高于白花蛇舌草组50 mg/mL(P<0.05)。与对照组比较,白花蛇舌草组100 mg/mL时Bcl-xL和cIAP1蛋白表达降低(P<0.01,);caspase-3总量变化差异无统计学意义(P>0.05), cleaved caspase-3表达升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论HDE可能通过将HaCaT细胞阻滞在G1期而抑制其增殖,通过抑制Bcl-xL和cIAP1蛋白表达、提高cleaved caspase-3蛋白表达而促进HaCaT细胞凋亡,通过调控NF-κB而抑制HaCaT细胞炎症反应。
英文摘要:
      
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