补肾强督方对DBA/1小鼠组织形态学及Wnt通路的影响

作者	单位	E-mail
杨文雪，阎小萍，金玥
孔维萍	1.中日友好医院中医风湿病科（北京 100029）；2.免疫炎性疾病北京市重点实验室（北京 100029）	kongweiping75@126.com

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中文摘要:

目的观察补肾强督方对自发性强直性脊柱炎模型DBA/1小鼠关节韧带及附着点骨化程度和DKK1/Wnt通路的影响，探讨补肾强督方防治强直性脊柱炎的作用机制。方法将30只12周龄的雄性DBA/1小鼠随机分为模型组、阳性药物组、补肾强督方低、中、高剂量组，每组6只，另设6只同周龄C57BL/6小鼠作为空白组。补肾强督方低、中及高剂量组分别灌胃低、中、高浓度的补肾强督方，所含生药重量分别为11.25、22.5、45 g/（kg?d）， 0.2 mL/只，每日1次；阳性药物组灌胃塞来昔布胶囊0.8 mg/只，0.2 mL/只，每日1次；模型组及空白组灌胃等量的生理盐水。连续饲养、灌胃12周。定期观察小鼠体重、饮食、大便、毛发等情况。每两周评价1次小鼠关节炎体征。处死后取小鼠跟腱部位进行大体观察，对跟腱组织行HE染色，用免疫组化法检测小鼠跟腱中碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、骨钙素（bone gamma-carboxyglutamic-acid-containing proteins，BGP）、DKK1、Wnt5a的蛋白表达。结果与空白对照组比较，模型组关节炎体征评分明显升高，而补肾强督方各剂量组及阳性药物组评分均低于模型组 （P<0.05）。跟腱组织病理观察显示，正常组无炎性细胞及成纤维细胞浸润，组织形态结构正常；模型组出现不同程度的软骨及骨形成、炎性细胞及附着点成纤维样细胞浸润；各给药组小鼠跟腱组织多见散在淋巴细胞浸润，软骨及骨形成较少见。与空白组比较，模型组组织标本骨化评分升高，补肾强督方各剂量组及阳性药物组评分均低于模型组，差异有统计学意义（P<0.05）。与空白组比较，模型组DKK1蛋白表达降低，Wnt5a蛋白表达升高（P<0.05）；与模型组比较，补肾强督方高、中剂量组DKK1蛋白表达升高， Wnt5a蛋白降低，差异有统计学意义（P<0.05）。结论补肾强督方可能通过抑制经典Wnt通路来延缓自发性强直性脊柱炎模型DBA/1小鼠关节炎及骨化程度的发生与发展。

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