肺瘤平膏含药血清对巨噬细胞共培养条件下A549细胞EMT相关mRNA及蛋白表达的影响

目的观察肺瘤平膏含药血清对A549细胞与巨噬细胞共培养条件下上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）相关mRNA及蛋白表达的影响。方法制备肺瘤平膏含药血清，建立A549细胞与巨噬细胞的共培养体系，将细胞分为A549加空白血清组（A549+NRS组）、共培养加空白血清组（共培养+NRS组）及共培养加肺瘤平膏含药血清组（共培养+FLP组）。采用荧光定量PCR、免疫荧光法比较各组A549细胞EMT相关基因（SNAIL1、SNAIL2、ZEB1、CDH1、CDH2、VIM、TJP1、CLDN1、CTNNB1、FLRT1）及E-cadherin、N-cadherin、ZO-1、Vimentin蛋白表达水平的影响。结果共培养条件下，A549细胞变为间充质细胞样。加入肺瘤平膏含药血清后，部分A549细胞形态恢复为上皮细胞样。与A549+NRS组比较，共培养+NRS组A549细胞SNAIL1、ZEB1、CTNNB1、FLRT1、CDH2、VIM mRNA表达上调，TJP1 mRNA表达下调（均P<0.05）；与共培养+NRS组比较，共培养+FLP组SNAIL2、TJP1、CLDN1、CDH1、VIM mRNA表达上调，CTNNB1、FLRT1及CDH2 mRNA表达下调（均P<0.05）。免疫荧光结果显示，E-cadherin表达于细胞膜和胞浆内，以细胞膜为主；N-cadherin表达于细胞膜和胞浆内，以细胞浆为主；Vimentin表达于胞浆内；ZO-1表达于细胞连接处为主，部分细胞膜染色亦呈阳性。与A549+NRS组比较，共培养+NRS组A549细胞E-cadherin蛋白表达下调，N-cadherin及Vimentin蛋白表达上调（P<0.05）；肺瘤平膏含药血清可上调E-cadherin表达，下调N-cadherin及Vimentin蛋白表达（均P<0.05）。结论肺瘤平膏可抑制共培养条件下A549细胞EMT的形成。

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