张晓丽,赵晓勇.滋肾育胎丸对免疫性不孕模型大鼠卵母细胞生物学行为的调节作用[J].中国中西医结合杂志,2017,37(03):0351-355 |
滋肾育胎丸对免疫性不孕模型大鼠卵母细胞生物学行为的调节作用 |
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DOI:10.7661/CJIM.2017.03.0351 |
中文关键词: 滋肾育胎丸 免疫性不孕 卵母细胞 生物学行为 |
英文关键词: |
基金项目:广东省科技厅科技项目(No.2015A030302004,No.2015A030302003);广东省中医药局科技项目(No.20161191,No.20151061);广东省自然科学基金资助项目(No. 2016A030313419) |
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中文摘要: |
目的 探讨滋肾育胎丸对抗精子抗体(AsAb)阳性的不孕大鼠卵母细胞的干预作用。方法 采用主动免疫建立AsAb阳性的免疫性不孕模型。将100只雌性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组及滋肾育胎丸低、中、高剂量组(简称中药低、中、高剂量组),每组20只。造模22 天开始灌胃给药,模型组给予 5 mL/kg生理盐水灌胃,中药低、中、高剂量组分别给予0.075、0.100、0.150 g/mL滋肾育胎丸灌胃,每天1次,至36天。分别在造模21天及36天采用ELISA法测定AsAb和转化生长因子(transforming growth factor-β,TGF-β)水平。处死大鼠后取卵母细胞,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot分别检测TGF-β mRNA及其蛋白表达水平;采用流式细胞学(FCM)和末端终未标记(TUNEL)法测定卵母细胞凋亡率;采用细胞计数-8法(CCK-8) 及5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷 (5-ethynyl-2′-deoxyuridine, EdU)检测卵母细胞增殖水平;采用划痕实验及侵袭小室(Transwell)测定卵母细胞迁移与侵袭能力。结果 与空白对照组比较,模型组卵母细胞凋亡增加,细胞增殖减少,迁移与侵袭能力减弱,TGF-β mRNA及其蛋白表达水平显著下调(P<0.05);与模型组比较,中药高剂量组卵母细胞凋亡减少,细胞增殖增加,迁移与侵袭能力增强,TGF-β mRNA及其蛋白表达水平显著上调(均P<0.05);且中药高剂量组作用明显优于中药低、中剂量组(P<0.05)。结论 应用高剂量滋肾育胎丸干预免疫性不孕大鼠可明显上调其卵母细胞TGF-β水平,改善卵母细胞功能。 |
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