柴苓汤诱导小鼠心脏移植免疫耐受的实验研究

目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin， mTOR）信号通路在柴苓汤诱导调节性T细胞（regulatory T cells， Tregs）增殖以及诱导小鼠同种异体心脏移植免疫耐受中的作用。方法以CC57BL/6j（H-2b）小鼠为供体、C3H/He（H-2k）小鼠为受体建立腹部心脏移植模型，术后随机分为对照组、雷帕霉素组和柴苓汤组，每组20只。每天分别用无菌生理盐水、雷帕霉素（1.5 mg/kg）和柴苓汤（2 g/kg）灌胃，共7天。术后观察3组小鼠移植心脏生存期及心脏形态学改变；术后第7天，采用流式细胞术和RT-PCR分别检测受体脾脏Tregs百分率和Foxp3 mRNA的表达量；RT-PCR和Western blot检测mTOR通路分子的mRNA（mTOR、P70s6k）和磷酸化蛋白（p-mTOR、p-P70s6k）的表达水平。结果柴苓汤组和雷帕霉素组移植心脏生存时间较对照组均明显延长（P<0.05）；术后第7天，病理结果显示对照组出现典型细胞免疫性损伤改变，柴苓汤组和雷帕霉素组少许炎症细胞浸润。柴苓汤组和雷帕霉素组Tregs百分率和Foxp3 mRNA表达量较对照组均明显增加（P<0.05）；柴苓汤组和雷帕霉素组mTOR通路分子的mRNA和磷酸化蛋白的表达较对照组均明显下调（P<0.05），柴苓汤组和雷帕霉素组间比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。结论柴苓汤可以通过抑制mTOR通路分子表达来诱导Tregs增殖，从而实现诱导小鼠心脏移植免疫耐受。

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