郭世明,郑亚明,陈 盛,林燕萍.青娥方含药血清对破骨细胞前体RAW 264.7细胞FAK/Src/p130Cas通路及上清液炎症因子的影响[J].中国中西医结合杂志,2018,38(1):85-90 |
青娥方含药血清对破骨细胞前体RAW 264.7细胞FAK/Src/p130Cas通路及上清液炎症因子的影响 |
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DOI:10.7661/j.cjim.20170614.138 |
中文关键词: 青娥方 含药血清 RAW 264.7 FAK/Src/p130Cas通路 炎症因子 |
英文关键词: |
基金项目:国家自然科学基金资助项目(No. 81574003);福建省科技厅引导性项目(No. 2015Y0069);陈可冀中西医结合发展基金资助(No.CKJ2014003, No. CKJ201411) |
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中文摘要: |
目的 观察青娥方含药血清对破骨细胞前体RAW 264.7细胞 FAK/Src/p130Cas 通路相关基因蛋白表达及上清液炎症因子的影响。 方法 制备青娥方含药血清和生理盐水血清,分别干预体外培养的破骨细胞前体RAW 264.7细胞。干预12 h和24 h后,提取mRNA 和蛋白,荧光定量PCR(qPCR)检测FAK/Src/p130Cas及下游信号关键因子CRK、C3G和RAS mRNA表达的变化,应用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测FAK/Src/p130Cas及下游信号关键因子CRK、C3G和RAS蛋白表达的变化;应用ELISA法检测细胞上清液IL-6、TNF-α、PGE2含量。结果 与同期生理盐水血清组比较,青娥方含药血清组FAK、Src、p130Cas、CRK、C3G和RAS的RNA和蛋白表达均明显减少(P<0.05,P<0.01),以FAK、Src、p130Cas下降最为显著,而细胞上清液炎症因子IL- 6,TNF-α和PGE2含量明显下降(P<0.05,P<0.01)。 结论 青娥方含药血清能够下调FAK/Src/p130Cas及其下游信号分子的表达,抑制RAW 264.7细胞分泌炎症因子,从而抑制RANKL+MCSF诱导的破骨细胞分化。 |
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