陈旭凤,喻澜,夏秦.淫羊藿苷促前成骨细胞MC3T3-E1成骨分化的实验研究[J].中国中西医结合杂志,2018,38(6):687-692 |
淫羊藿苷促前成骨细胞MC3T3-E1成骨分化的实验研究 |
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DOI:10.7661/j.cjim.20180205.107 |
中文关键词: 淫羊藿苷 前成骨细胞MC3T3-E1 成骨分化 Wnt/β-catenin/BMP-2信号通路 |
英文关键词: |
基金项目:湖北省自然科学基金资助项目(No.2016CFB676) |
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中文摘要: |
目的探讨淫羊藿苷(icariin, ICA)促进前成骨细胞MC3T3-E1成骨分化的机制。方法采用不同浓度(10-10~10-5mol/L)的ICA干预前成骨细胞MC3T3-E1 3、6、9天后采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)活性检测试剂盒测定ALP活性,确定ICA最适促分化浓度。最适ICA浓度干预前成骨细胞MC3T3-E1 7天后应用实时定量PCR法(real time-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测骨形态发生蛋白(BMP)和Wnt/β-catenin信号通路相关分子(BMP-2、Runx2、β-catenin、cyclinD1)基因表达。ICA分别与BMP、Wnt/β-catenin信号通路抑制剂(Noggin、DKK-1)联合干预前成骨细胞MC3T3-E1后,茜素红钙结节染色观察钙化程度以及Western blot检测BMP-2蛋白表达变化。结果ICA促进前成骨细胞MC3T3-E1成骨分化,且10-9mol/L ICA促进分化的能力最强。与对照组比较,ICA能明显上调BMP和Wnt/β-catenin信号通路相关分子(BMP-2、Runx2、β-catenin、cyclinD1)mRNA表达(P<0.01)。Noggin或DKK-1能抑制前成骨细胞MC3T3-E1钙化,且两者联合作用时抑制更加明显。与ICA单独作用比较,ICA与DKK1联合干预后BMP-2蛋白表达水平下降(P<0.01)。结论ICA可能通过Wnt/β-catenin/BMP-2信号通路调控前成骨细胞MC3T3-E1的成骨分化。 |
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