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陈旭凤,喻澜,夏秦.淫羊藿苷促前成骨细胞MC3T3-E1成骨分化的实验研究[J].中国中西医结合杂志,2018,38(6):687-692
淫羊藿苷促前成骨细胞MC3T3-E1成骨分化的实验研究
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DOI:10.7661/j.cjim.20180205.107
中文关键词:  淫羊藿苷  前成骨细胞MC3T3-E1  成骨分化  Wnt/β-catenin/BMP-2信号通路
英文关键词:
基金项目:湖北省自然科学基金资助项目(No.2016CFB676)
作者单位E-mail
陈旭凤,喻澜   
夏秦 华中科技大学同济医学院附属同济医院老年病科(武汉 430030) 463322755@qq.com 
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中文摘要:
      目的探讨淫羊藿苷(icariin, ICA)促进前成骨细胞MC3T3-E1成骨分化的机制。方法采用不同浓度(10-10~10-5mol/L)的ICA干预前成骨细胞MC3T3-E1 3、6、9天后采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)活性检测试剂盒测定ALP活性,确定ICA最适促分化浓度。最适ICA浓度干预前成骨细胞MC3T3-E1 7天后应用实时定量PCR法(real time-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测骨形态发生蛋白(BMP)和Wnt/β-catenin信号通路相关分子(BMP-2、Runx2、β-catenin、cyclinD1)基因表达。ICA分别与BMP、Wnt/β-catenin信号通路抑制剂(Noggin、DKK-1)联合干预前成骨细胞MC3T3-E1后,茜素红钙结节染色观察钙化程度以及Western blot检测BMP-2蛋白表达变化。结果ICA促进前成骨细胞MC3T3-E1成骨分化,且10-9mol/L ICA促进分化的能力最强。与对照组比较,ICA能明显上调BMP和Wnt/β-catenin信号通路相关分子(BMP-2、Runx2、β-catenin、cyclinD1)mRNA表达(P<0.01)。Noggin或DKK-1能抑制前成骨细胞MC3T3-E1钙化,且两者联合作用时抑制更加明显。与ICA单独作用比较,ICA与DKK1联合干预后BMP-2蛋白表达水平下降(P<0.01)。结论ICA可能通过Wnt/β-catenin/BMP-2信号通路调控前成骨细胞MC3T3-E1的成骨分化。
英文摘要:
      
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