复方健耳剂干预庆大霉素耳毒性致豚鼠毛细胞损害的实验研究

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宣伟军	广西中医药大学第一临床医学院耳鼻咽喉头颈外科（南宁 530023）	xuan5352100@sina.com
黄力毅，韦瑀龙，陈壮

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目的探讨中药复方健耳剂干预豚鼠庆大霉素（gentamycin，GM）耳毒性致外毛细胞损害的作用及可能机制。方法选择杂色成年豚鼠48只，随机分为正常对照组、GM对照组、复方健耳剂+GM组（简称中药+ GM组），每组16只，其中正常对照组按常规饲养至第11天期满；GM对照组按200 mg/（kg·d）剂量，每天分2次连续注射9天，第11天终止饲养；中药+GM组按3.994 g/（kg·d）剂量（1/2人工灌服，1/2自动饮用），预先服用复方健耳剂10天，然后在继续服用中药同时开始注射每天同等剂量GM，连续9天，第11天终止饲养。所有动物期满取出耳蜗，其中每组10只动物用于全耳蜗基底膜铺片，琥珀酸脱氢酶染色，进行耳蜗毛细胞形态学观察，另外每组6只动物，利用Real-time PCR技术检测耳蜗组织硫氧还蛋白（Trx）-1、Trx-2、凋亡信号调节激酶1（apoptosis signal-regulating kinase 1，ASK1） mRNA表达量。结果全耳蜗基底膜检查显示，正常对照组各回三排内、外毛细胞形态正常，数量完整，排列有序；GM对照组各回三排外毛细胞损毁严重，绝大部分细胞出现严重崩解不全，或凋亡缩小，第1回比其他各回损害较重（P<0.01），但内毛细胞仍基本存在；中药+GM组各回三排外毛细胞除少量和散在崩解不全外，大多仍存留可辨，形态如常，内毛细胞仍保持完整，各回外毛细胞损毁状况明显少于GM对照组（P<0.01）。中药+GM组Trx-1、Trx-2 mRNA表达明显高于GM对照组（P<0.01），ASK1 mRNA表达则明显低于GM对照组（P<0.01）。结论一定剂量GM连续使用可造成豚鼠耳蜗外毛细胞严重损害，并以第1回明显，而且以外毛细胞为主要损害靶细胞。复方健耳剂具有防治GM耳毒性外毛细胞损害作用，其机制可能与其调控硫氧还蛋白系统，阻止ASK1依赖的细胞凋亡有关。

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