特女贞苷对血管内皮细胞氧化损伤的作用研究

目的研究特女贞苷对过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞（EA.hy926）中p66Shc及凋亡相关蛋白表达水平的作用。方法采用H2O2诱导EA.hy926形成氧化应激损伤的血管内皮细胞模型，随机分为空白组、模型组（H2O2）、特女贞苷组（H2O2+5、50、500 μmol/L特女贞苷）、阴性对照组（H2O2+5、50、500 μmol/L DMSO）、抗坏血酸组（H2O2+5、50、500 μmol/L抗坏血酸）。检测各组细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量、β-gal活性；采用Western blot法测定p66Shc、caspase-3活体剪切体、Bax、Bcl-2蛋白含量；实时荧光定量PCR（qPCR）法检测p66 mRNA含量。结果与空白组比较，模型组及阴性对照组SOD活性、Bcl-2表达量及Bcl-2/Bax比值下降，MDA含量、β-gal活性、p66Shc蛋白水平及mRNA含量、capase-3活性剪切体和Bax表达水平升高（均 P<0.05）。与模型组比较，特女贞苷组及抗坏血酸组SOD升高，MDA含量（除特女贞苷组浓度500 μmol/L外）和β-gal活性降低（P<0.01），抑制p66Shc表达及mRNA水平（P<0.01）；特女贞苷组Bax和capase-3活性剪切体（除浓度 500 μmol/L外）表达水平降低，Bcl-2表达和Bcl-2/Bax比值升高（均 P<0.01）。与同浓度的抗坏血酸组比较，特女贞苷组对Bax、Bcl-2蛋白水平、Bcl-2/Bax比率、p66 mRNA的调节作用较明显（P<0.05）。结论特女贞苷可能通过抑制p66Shc削弱血管内皮细胞的氧化损伤及降低凋亡相关蛋白的表达。

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