二仙汤对过氧化氢诱导的人卵巢颗粒细胞氧化损伤的保护作用

目的探讨二仙汤对过氧化氢（H2O2）诱导人卵巢颗粒细胞（COV434）氧化损伤的保护作用及其可能机制。方法体外培养COV434细胞，0.5 mmol/L H2O2诱导COV434氧化损伤。将细胞分为空白组、模型组（H2O2 0.5 mmol/L）、二仙汤水提液低、中、高剂量组（0.5、1、5 mg/mL+ H2O2 0.5 mmol/L）。MTT分析细胞存活率，DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧族（ROS）水平，微量酶标法测定细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）的释放。Annexin V-FITC/PI 双染和PI 染色，分别检测细胞凋亡和周期。Western blot检测HO-1、NQO-1、P-JNK、P-44/42、P-p38、Bax、Bcl-2、Caspase-9蛋白表达。结果与空白组比较，模型组细胞存活率下降，ROS及LDH水平增加，S期百分率、早期凋亡、晚期凋亡及总凋亡比例显著增高（P<0.01），Bax、Caspase-9及P-JNK蛋白表达升高（P<0.05）。与模型组比较，二仙汤水提液低、中、高剂量组LDH、S期百分率降低，G2/M 期百分率升高（P<0.05），二仙汤水提液中、高剂量组细胞存活率升高，ROS释放量、早期凋亡及总凋亡比例降低（P<0.05， P<0.01），二仙汤水提液低、中剂量组P-44/42蛋白表达升高（P<0.05）。结论二仙汤在一定剂量范围内对 H2O2诱导的COV434细胞损伤具有明显的保护作用，其保护效应可能与清除 ROS，减轻 DNA 氧化损伤，调控MAPK-Nrf2 信号通路及线粒体通路介导的细胞凋亡有关。

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