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傅书山,朱磊,王琼,沈洪.清肠化湿方对溃疡性结肠炎湿热证小鼠NLRP6蛋白及相关炎症因子表达的影响[J].中国中西医结合杂志,2020,40(5):582-588
清肠化湿方对溃疡性结肠炎湿热证小鼠NLRP6蛋白及相关炎症因子表达的影响
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DOI:10.7661/j.cjim.20200309.312
中文关键词:  溃疡性结肠炎  清肠化湿方  pyrin结构域蛋白6  白介素-1β  白介素-18
英文关键词:
基金项目:国家自然科学基金资助项目(No. 81873260,81673905); 国家重点研发计划(No. 2017YFC1700104); 江苏省高校优势学科建设工程资助项目(No. 苏政办发[2018]87号); 南京中医药大学中医学优势学科三期项目开放课题(No. ZYX03KF023)
作者单位E-mail
傅书山,朱磊,王琼   
沈洪 南京中医药大学附属医院江苏省中医院消化科(南京 210029) shenhong999@163.com 
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中文摘要:
      目的探讨清肠化湿方对溃疡性结肠炎(UC)湿热证小鼠NLRP6蛋白及相关炎症因子和紧密连接蛋白Claudin-2、Claudin-5的影响。方法60只C57BL/6 雄性小鼠随机分为空白组,模型组,美沙拉嗪组,低、中、高剂量中药组。除空白组外,其余小鼠置于高温、高湿环境,喂养高糖高脂饲料,饮用 2.5%葡聚糖硫酸钠(DSS)蒸馏水 1 周造成 UC湿热证模型。低、中、高剂量中药组分别予浓度8.125、16.250、32.500 g/(kg·d)清肠化湿方灌胃,美沙拉嗪组小鼠予美沙拉嗪溶液灌胃,空白组和模型组给予相同体积的生理盐水灌胃。灌胃7天,观察小鼠的一般情况、体重、粪便性状及隐血情况,进行DAI评分,记录小鼠每小时排出的湿粪粒数以及湿粪重量,测量小鼠结肠长度。HE染色观察结肠病理情况; Western Blot法检测结肠NLRP6、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白(Caspase-1)、紧密连接蛋白(Claudin-2)、Claudin-5表达水平;ELISA法检测血清白细胞介素-18(IL-18)、IL-1β含量;Real-time PCR 法检测结肠NLPR6、caspase-1、Claudin-2、Claudin-5 mRNA表达水平。结果与空白组比较,模型组小鼠DAI评分升高 (P<0.01),结肠长度变短(P<0.01);结肠黏膜病理受损严重;NLRP6、Claudin-5 蛋白表达降低(P<0.05),Caspase-1、Claudin-2蛋白表达增加(P<0.05,P<0.01);血清中炎症因子IL-1β含量增高(P<0.05);NLRP6、Claudin-5 mRNA表达降低(P<0.01),Caspase-1、Claudin-2 mRNA表达增加(P<0.05, P<0.01)。与模型组比较,美沙拉嗪组、中剂量中药组DAI评分降低(P<0.01),结肠长度增长(P<0.01)、病理情况改善;中剂量中药组NLRP6、Claudin-5 蛋白表达上调(P<0.05),各治疗组Caspase-1蛋白表达减少(P<0.05),美沙拉嗪组及中、高剂量中药组Claudin-2蛋白表达减少(P<0.01);美沙拉嗪组及低、中剂量中药组血清IL-1β含量降低(P<0.05, P<0.01),美沙拉嗪组、高剂量中药组NLRP6 mRNA表达上调(P<0.01, P<0.05),各治疗组Caspase-1 mRNA表达下调(P<0.05),美沙拉嗪组及中、高剂量组Claudin-2 mRNA表达下调,中、高剂量组Claudin-5 mRNA表达上调(P<0.05)。结论清肠化湿方能够调节NLRP6蛋白及相关炎症因子、紧密连接蛋白表达水平,从而减轻肠道炎症反应,缓解肠黏膜损伤。
英文摘要:
      
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