滋补脾阴方药对脾阴虚大鼠肠黏膜屏障的调控作用

作者	单位	E-mail
孙晓霞，周雯
战丽彬	南京中医药大学中医学院·中西医结合学院，　中医脾藏象现代研究实验室（南京　210023）	zlbnj@njucm.edu.cn

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中文摘要:

目的观察脾阴虚状态下肠黏膜屏障的改变及滋补脾阴方药的调控作用。方法将SPF 级雄性Wistar大鼠随机分为正常组（简称C组）6只和模型组（简称M组）14只。采用饮食不节与劳倦过度结合耗伤阴液法建立脾阴虚大鼠模型。脾阴虚造模后将M组随机分为脾阴虚组（简称S组）和滋补脾阴方药组（简称Z组）。每周收集粪便进行16S rRNA测序。采用qPCR技术检测空肠Claudin-1、Occludin、ZO-1 mRNA水平；Western Blot法检测空肠Claudin-1、Occludin、ZO-1蛋白表达；ELISA法检测肠道炎症因子水平。结果在门水平上，S组较C组厚壁菌门比例增加（P<0.05），拟杆菌门下降（P<0.05），Z组较S组厚壁菌门减少（P<0.01），拟杆菌门增加（P<0.01）；在属水平上，S组较C组乳杆菌属和Paraprevotella属比例升高（P<0.05，P<0.01），瘤胃球菌属和粘放线菌属下降（P<0.01，P<0.05）；Z组比较于S组乳杆菌属比例明显减少（P<0.0001），瘤胃球菌属和粘放线菌属增加（P<0.05，P<0.01）， Paraprevotella属呈下降趋势（P>0.05）。与C组比较，S组空肠Claudin-1 mRNA和蛋白表达下降（P<0.05，P<0.01），Occludin mRNA和蛋白表达降低（P<0.01），ZO-1 mRNA和蛋白表达呈降低趋势（P>0.05）；与S组比较，Z组Claudin-1 mRNA和蛋白水平升高（P<0.01），Occludin mRNA和蛋白表达增加（P<0.05），ZO-1 mRNA和蛋白水平呈上升趋势。S组空肠IFN-γ和IL-17含量较C组增加（P<0.001），sIgA、TGF-β、IL-4与IL-10水平下降（P<0.01， P<0.001）；Z组较S组IFN-γ、IL-17 含量减少（P<0.001， P<0.01），sIgA、TGF-β、IL-4与IL-10含量升高（P<0.01， P<0.001）。结论滋补脾阴方药能够调节肠道菌群中厚壁菌门、拟杆菌门、瘤胃球菌属、乳酸杆菌属与粘放线菌属比例，增加Claudin-1、Occludin mRNA和蛋白表达，并调节Th1/Th2、Th17/Treg细胞分泌的细胞因子水平，改善脾阴虚大鼠肠黏膜生物屏障、机械屏障及免疫屏障的异常变化。

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