参灵抗癌方经 PI3K/AKT 通路调控 Bim 表达逆转胃癌细胞失巢凋亡抵抗的作用及机制

目的观察参灵抗癌方（SLKAF）逆转胃癌细胞失巢凋亡抵抗作用，并从磷脂酰肌醇原3原激酶/丝苏氨酸蛋白激酶（PI3K/AKT）调控 Bcl-2 细胞死亡调解子抗体（Bim）表达为切入点探讨其作用机制。方法采用梯度剂量的 SLKAF（0，1，2，4，8，16 mg/mL）与 SGC-7901 胃癌细胞共培养，MTT 法检测胃癌细胞活力，GraphPad Prism7.0 计算半数抑制浓度（IC50），并以 1×IC50、2×IC50 分别作为 SLKAF 干预 SGC-7901细胞的低剂量和高剂量。运用 RNA 干扰技术将 Bim-siRNA 转染 SGC-7901 细胞，qPCR 技术检测 Bim 表达，观察对 Bim 表达的抑制效率曰以 SLKAF 低、高剂量分别与 SGC-7901 细胞和经 Bim-siRNA 转染的SGC-7901 细胞共培养，分别采用 qPCR 和 Western Blot 检测 PI3K、AKT 的表达，流式细胞技术检测细胞凋亡率，软琼脂克隆形成实验检测细胞克隆形成能力。结果 SLKAF 对 SGC-7901 细胞增殖有显著的抑制作用（P<0.01），并呈明显的量效应关系，IC50 为 7.626 mg/mL，故确定 8、16 mg/mL 分别作为低剂量和高剂量。 Bim-siRNA 转染 SGC-7901 细胞可抑制 Bim 表达（P<0.05）。 SLKAF 高、低剂量均降低 SGC-7901 细胞 PI3K、AKT 表达（P<0.05，P<0.01），提高胃癌细胞凋亡率（P<0.05，P<0.01），降低胃癌细胞克隆形成能力（P<0.01）曰与低剂量比较，高剂量 SLKAF 作用下的 SGC-7901 细胞/ 经 Bim-siRNA 转染的SGC-7901 细胞表达 PI3K、AKT 均降低（P<0.01），胃癌细胞凋亡率升高（P<0.05），细胞克隆形成数降低（P<0.05）曰在 SLKAF 相同剂量下，SGC-7901 细胞和经 Bim-siRNA 转染的 SGC-7901 细胞表达 PI3K、AKT 比较，差异无统计学意义（P>0.05），但细胞凋亡率和细胞克隆形成能力差异均有统计学意义（P <0.01）。结论 SLKAF 经 PI3K/AKT 调控 Bim 表达逆转胃癌细胞失巢凋亡抵抗。

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