| 吴承杰,马 勇,郭 杨,潘娅岚.基于HDAC6介导的自噬 - 溶酶体途径探究温肾通督方对微血管内皮细胞吞噬髓鞘碎片的影响[J].中国中西医结合杂志,2022,42(5):589-596 |
| 基于HDAC6介导的自噬 - 溶酶体途径探究温肾通督方对微血管内皮细胞吞噬髓鞘碎片的影响 |
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| DOI：10.7661/j.cjim.20220127.122 |
| 中文关键词: 脊髓损伤 温肾通督方 微血管内皮细胞 组蛋白脱乙酰基酶，自噬 - 溶酶体 髓鞘碎片 |
| 英文关键词: |
| 基金项目:国家自然科学基金面上项目（ No.81973885）；国家自然科学基金青年项目（ No.81704100）；南京中医药大学自然科学基金青年项目（ No.NZY81704100）；江苏高校优势学科（中西医结合）建设工程资助项目（ No. 苏政办发 [2018]87 号）； 2020 年江苏省研究生科研与实践创新计划项目（ No.KYCX20-1533） |
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| 中文摘要: |
| 目的 基于组蛋白脱乙酰基酶（ HDAC） 6 介导的自噬 - 溶酶体途径，探究温肾通督方影响微血管内皮细胞（ MECs）吞噬髓鞘碎片的作用机制。 方法 通过 CCK-8 法检测温肾通督方冻干粉干预后MECs 的增殖状态，筛选其最佳干预浓度；构建体外类血管结构，并建立髓鞘碎片与类血管结构共培养模型；将实验分为空白组（ MECs）、模型组（ MECs 与髓鞘碎片共培养）、 Tubastatin-A 组（ MECs 与髓鞘碎片共培养 + HDAC6 抑制剂 Tubastatin-A）以及温肾通督方组（ MECs 与髓鞘碎片共培养 + 温肾通督方冻干粉），通过免疫荧光染色法检测 MECs 吞噬髓鞘碎片的情况，并利用激光共聚焦进行拍照分析；通过Western Blot 法检测 MECs 微管稳定系统（ HDAC6、 Kinesin5、 Dynein）及自噬 - 溶酶体途径（ LC3 Ⅱ /LC3 Ⅰ、 p62、 Beclin1）相关蛋白的表达。 结果 免疫荧光结果表明，与模型组比较， Tubastatin-A 组和温肾通督方组都可显著促进 MECs 吞噬髓鞘碎片（ P<0.05）。 Western Blot 结果表明，与空白组比较，模型组 HDAC6 的蛋白表达显著增高（ P<0.05）；与模型组比较， Tubastatin-A 组和温肾通督方组 HDAC6的蛋白表达显著降低，而 Kinesin5、 Dynein、 Beclin1、 p-ULK1/ULK1 的蛋白表达显著增高（ P<0.05）；与 Tubastatin-A 组比较，温肾通督方组 HDAC6、 Kinesin5、 Dynein、 LC3 Ⅱ /LC3Ⅰ、 Beclin1、 p-ULK1/ULK1 的表达差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论 MECs 吞噬髓鞘碎片会导致 HDAC6 的表达上调，但并不会影响 MECs 微管稳定系统及自噬 - 溶酶体途径； Tubastatin-A 及温肾通督方均可通过抑制 HDAC6的表达增强 MECs 微管系统的稳定，进而激活自噬 - 溶酶体途径，促进 MECs 吞噬髓鞘碎片。 |
| 英文摘要: |
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