基于LXRs/NF-κB信号通路对A型滑膜细胞的调控探讨壮骨健膝方的作用机制

作者	单位	E-mail
陈鹏,郭洁梅,肖艳
苏友新	1.福建中医药大学康复医学院（福州?350122）；2.福建中医药大学中医学院（福州?350122）	suyouxin777@hotmail.com

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中文摘要:

目的观察壮骨健膝方含药血清对脂多糖（LPS）诱导的兔A型滑膜细胞肝X受体（LXRs）/核因子-κB（NF-κB）信号通路的影响，探讨壮骨健膝方治疗膝骨关节炎（KOA）滑膜炎症的机制。方法制备壮骨健膝方含药血清并采用超高效液相色谱质谱联用技术（UPLC-MS/MS）进行质量控制（龙胆苦苷885 ng/mL、阿魏酸185 ng/mL）。将兔A型滑膜细胞随机分为空白组和LPS组，LPS组经LPS诱导后建立炎症细胞模型，模型鉴定成功后随机分为模型组、壮骨健膝方组、LXRα抑制剂组、核受体辅助抑制因子（N-CoR）抑制剂组，分别予以10%空白血清、10%含药血清、10%含药血清+ LXRα抑制剂、10%含药血清+ N-CoR抑制剂，空白组予10%空白血清干预。干预24 h后，收集各组细胞及上清液，Western Blot、RT-qPCR检测各组细胞中LXRα、N-CoR、P50、P65蛋白及mRNA的表达，ELISA检测各组上清液中IL-1β、TNF-α、基质金属蛋白酶-3（MMP-3）及MMP-13含量。结果与空白组比较，模型组P50、P65蛋白与mRNA表达及IL-1β、TNF-α、MMP-3、MMP-13含量均升高（P<0.01），LXRα、N-CoR蛋白与mRNA表达下降（P<0.01）。与模型组比较，壮骨健膝方组P50和P65蛋白与mRNA表达及IL-1β、TNF-α、MMP-3、MMP-13含量均降低（P<0.01），LXRα、N-CoR蛋白与mRNA表达升高（P<0.01）；LXRα抑制剂组及N-CoR抑制剂组P50、P65蛋白与mRNA表达及IL-1β、TNF-α、MMP-3、MMP-13含量均降低（P<0.01，P<0.05）。与壮骨健膝方组比较，LXRα抑制剂组及N-CoR抑制剂组LXRα、N-CoR蛋白及mRNA表达下降（P<0.01），P50、P65蛋白及mRNA表达升高（P<0.01，P<0.05），两组IL-1β、TNF-α、MMP-3及MMP-13含量升高（P<0.01，P<0.05）。结论壮骨健膝方可通过上调LXRα和N-CoR蛋白及mRNA表达，下调P50、P65蛋白及mRNA表达，从而抑制LXRs/NF-κB信号通路的传导，减少下游炎症相关指标IL-1β、TNF-α、MMP-3及MMP-13的分泌，最终达到控制膝骨关节炎滑膜炎症反应的作用。

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