橙皮苷改善洛哌丁胺诱导便秘大鼠结肠SIP合胞体功能的研究

作者	单位	E-mail
占煜,闻永,杜丽娟,申旭龙,王晓翔,王雪霏
唐学贵	川北医学院肛肠疾病研究所（四川?637000）	txg668nc@sohu.com

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中文摘要:

目的探讨橙皮苷对便秘大鼠结肠SIP合胞体功能的影响及机制。方法将30只雄性Wistar大鼠随机分为模型组、橙皮苷低、中、高剂量组和聚乙二醇4000散干预组（简称西药组），模型组予以洛哌丁胺[1.5 mg/（kg· d）]灌胃，每天2次，连续14天，建立便秘模型，各干预组在此基础上于第8天起同步予以橙皮苷 [50、100、200 mg/（kg· d）]和聚乙二醇4000散[0.9 g/（kg· d）]灌胃，每天1次，连续7天。同时另设6只为空白组，灌胃给予等量的生理盐水。观察干预前后大鼠的一般情况、排便情况、体重、进食量、粪便含水量变化。第1、14天灌以墨汁后记录首粒黑便时间。采用ELISA法检测5-羟色胺（5-HT）、5-羟色胺4型受体（5-HT4R）含量，HE染色观察组织形态，Western Blot、qRT-PCR检测钙激活氯通道蛋白（ANO1）、酪氨酸受体激酶蛋白c-kit（c-kit）、血小板衍生因子受体α（PDGFRα）、P2嘌呤受体1（P2Y1）、SK3通道蛋白（SK3）蛋白及mRNA表达水平。免疫荧光双染检测结肠钙激活氯通道蛋白（ANO1）-PDGFRα和PDGFRα-蛋白基因产物9.5（PGP9.5）的表达分布。结果与空白组比较，模型组大鼠排便减少，间隔时间延长（P<0.01），粪质干硬、粪便含水量降低（P<0.05），结肠5-HT、5-HT4R含量均下降（P<0.05），组织结构及形态发生改变（上皮坏死脱落、肌纤维肿胀变厚、肌层变薄等），PDGFRα、ANO1和PGP9.5的阳性染色减少，PDGFRα、ANO1、P2Y1、c-kit、SK3蛋白及mRNA水平均降低（P<0.01）。与模型组比较，橙皮苷中、高剂量组及西药组排便间隔时间缩短，粪便含水量增加，5-HT和5-HT4R含量升高（P<0.05，P<0.01），橙皮苷均呈剂量-效应关系。橙皮苷高剂量组及西药组结肠组织形态明显恢复，PDGFRα、ANO1和PGP9.5的阳性染色增加，PDGFRα、ANO1、P2Y1、c-kit、SK3蛋白及mRNA水平均增加（P<0.01）。结论橙皮苷可能通过上调结肠ANO1、c-kit、PDGFRα、P2Y1、SK3表达水平，恢复Cajal间质细胞和PDGFRα+细胞的表型及功能，改善SIP合胞体功能及结肠动力，从而干预便秘大鼠。

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