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宋翠淼,杨宏敏,陆君,杜惠兰.补肾调经方含药血清对体外培养的人卵巢颗粒细胞FSH/cAMP-PKA通路的影响[J].,2014,34(03):0317-324
补肾调经方含药血清对体外培养的人卵巢颗粒细胞FSH/cAMP-PKA通路的影响
  
DOI:10.7661/CJIM.2014.03.0317
中文关键词:  补肾调经方  颗粒细胞  卵泡刺激素  环磷酸腺苷-蛋白激酶A通路  雌二醇
英文关键词:
基金项目:国家自然科学基金资助项目(No. 30772818)
Author NameAffiliationE-mail
宋翠淼,杨宏敏,陆君   
杜惠兰 河北中医学院中西医结合妇产科学教研室中西医结合生殖疾病协同创新中心(石家庄050091) duhuilan@163. com 
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中文摘要:
      目的通过补肾调经方含药血清对体外培养的人卵巢颗粒细胞卵泡刺激素/环磷酸腺苷-蛋白激酶A(follicle stimulating hormone/cyclic adenosine monophosphate-protein kinase A, FSH/cAMP-PKA)通路的影响,探讨补肾调经方改善卵巢内分泌功能可能的分子机制。方法收集行体外受精-胚胎移植(In vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)患者卵泡液,提取颗粒细胞进行原代细胞培养24 h,以低、中、高剂量补肾调经方人、大鼠含药血清以及正常人、大鼠血清分别与体外培养的人卵巢颗粒细胞共同孵育48 h,分为补肾调经方低、中、高剂量组以及对照组。采用放射免疫方法测定培养液中雌二醇(estrogen,E2)、孕酮(progesterone,P)、环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)的水平,采用蛋白印迹法和Real-time PCR分别检测卵泡刺激素受体(follicle stimulating hormone receptor,FSHR)蛋白和FSHR、P450芳香化酶(P450 aromatase,P450arom)mRNA在颗粒细胞的表达。结果人含药血清组:与对照组比较,补肾调经方中、高剂量组培养液中E2、cAMP水平均明显升高(P<0.05),补肾强经方中剂量组P明显降低(P<0.01);补肾调经方中、高剂量组卵巢颗粒细胞FSHR蛋白及其mRNA表达均明显增高(P<0.01), P450芳香化酶mRNA表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。大鼠含药血清组:与对照组比较,补肾调经方中、高剂量组E2均升高(P<0.01),cAMP明显升高(P<0.05, P<0.01),补肾调经方中剂量组P明显降低(P<0.01);补肾调经方中、高剂量组人卵巢颗粒细胞FSHR蛋白及其mRNA表达均增高(P<0.01),P450芳香化酶mRNA表达明显升高(P<0.05, P<0.01)。结论补肾调经方可能通过调节卵巢颗粒细胞FSH/cAMP-PKA通路的主要效应分子FSHR、cAMP、P450arom、E2,促进卵巢颗粒细胞的内分泌功能。
英文摘要:
      
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