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傅淑平,杨丽,洪浩,张荣华.淫羊藿苷促SD大鼠骨髓间充质干细胞骨向分化作用的实验研究[J].,2015,35(07):0839-846
淫羊藿苷促SD大鼠骨髓间充质干细胞骨向分化作用的实验研究
  
DOI:10.7661/CJIM.2015.07.0839
中文关键词:  淫羊藿苷  骨髓间充质干细胞  骨向分化  核心结合蛋白因子  骨钙素
英文关键词:
基金项目:国家自然科学基金资助项目(No.81473509,No.81173619, No.81403479); 江苏省自然科学基金资助项目(No.BK20130956); 高等学校博士学科点专项基金资助项目(No.20133237120002)
Author NameAffiliationE-mail
傅淑平,杨丽,洪浩   
张荣华 暨南大学药学院中药教研室(广州510632) tzrh@jnu.edu.cn 
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中文摘要:
      目的观察淫羊藿苷促SD大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)骨向分化的作用特点。方法(1)采用机械分离及全骨髓贴壁法分离培养SD大鼠BMSCs,氨基安替吡啉测酚法检测不同浓度的淫羊藿苷在第3、6、9、12、15、18、21天对细胞上清液中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)活性的影响,采用茜素红染色法检测各浓度组BMSCs矿化情况,观察不同浓度的淫羊藿苷促BMSCs骨向分化的作用。(2)将BMSCs细胞分为空白对照组、成骨诱导组及淫羊藿苷组(0.5 μg/mL),在培养第7、14、21天检测各组细胞上清ALP活性,并于第14及21天分别检测各组细胞ALP阳性染色率与矿化结节数,同时采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测3个不同时间点各组细胞中核心结合蛋白因子(Runt-related transcripition factor-2, Runx2)及骨钙素(Osteocalcin)mRNA的表达水平。结果(1) 0.05~5.0 μg/mL淫羊藿苷均可明显提高细胞上清液中ALP活性,其中0. 2~ 2.0 μg/mL浓度组细胞结节数亦明显增加(P<0.01)。(2)淫羊藿苷促BMSCs 骨向分化时,Runx2 mRNA表达水平及ALP活性均先升后降;Osteocalcin mRNA表达水平则持续上升(P<0.01);与成骨诱导组比较,作用14天后,淫羊藿苷组ALP活性及ALP阳性染色率均明显提高(P<0.05, P<0.01)。结论淫羊藿苷通过上调Runx2基因的表达,促使BMSCs向成骨细胞分化,并通过增加细胞ALP分泌及Osteocalcin基因的表达,促进细胞矿化的发生,从而促使新生成骨细胞的成熟。
英文摘要:
      
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