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王新慧,赵 雯,李 澎,余仁欢.健脾祛湿和络方含药血清对足细胞标志蛋白Nephrin、Podocalyxin及mTOR表达的影响[J].,2018,38(9):1106-1111
健脾祛湿和络方含药血清对足细胞标志蛋白Nephrin、Podocalyxin及mTOR表达的影响
  
DOI:10.7661/j.cjim.20180814.223
中文关键词:  足细胞  健脾祛湿和络方  Nephrin蛋白  Podocalyxin蛋白  mTOR自噬相关因子
英文关键词:
基金项目:中国中医科学院自主选题研究项目(No.5050109)
Author NameAffiliationE-mail
王新慧,赵 雯,李 澎   
余仁欢 中国中医科学院西苑医院肾病科(北京 100091) tezhongeyu@vip.sina.com 
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中文摘要:
      目的 探讨健脾祛湿和络方(Jianpi Qushi Heluo Formula,JQHF)含药血清对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)诱导的小鼠足细胞损伤模型标志蛋白Nephrin、Podocalyxin及mTOR相关自噬因子表达的影响。方法 以体外培养小鼠足细胞为研究对象,除空白组外均以PAN(100 μ/mL)体外诱导足细胞,根据含药血清细胞培养基的不同分为空白组(10%空白血清),模型组(10%空白血清+PAN),JQHF低剂量组(10%低剂量JQHF含药血清+PAN),JQHF中剂量组(10%中剂量JQHF含药血清+PAN),JQHF高剂量组(10%高剂量JQHF含药血清+PAN),替米沙坦(TMST)组(10%TMST含药血清+PAN),醋酸泼尼松(PRE)组(10%PRE含药血清+PAN),雷帕霉素(RAP)组(100 μg/L RAP+10%空白组血清+PAN)。CCK-8法检测足细胞损伤模型在各组血清作用后的活性变化;Western blot法检测各组足细胞标志蛋白Nephrin、Podocalyxin及细胞内mTOR相关自噬蛋白表达水平。结果 (1)与空白组比较,模型组细胞活力显著下降(P<0.01),与模型组比较,JQHF高剂量、TMST、PRE及RAP组足细胞活力上升(P<0.05);(2)与模型组比较,除JQHF低剂量组Podocalyxin表达外,其余各药物干预组Nephrin、Podocalyxin表达均增多(P<0.05, P<0.01);与JQHF低剂量组比较,JQHF高剂量、TMST、PRE及RAP组Nephrin表达增多(P<0.05);与JQHF中剂量组比较,JQHF高剂量、TMST、PRE及RAP组Nephrin表达增多(P<0.05),TMST、PRE、RAP组Podocalyxin表达亦增多(P<0.05);与JQHF高剂量组比较,TMST、PRE、RAP组Podocalyxin表达增多(P<0.05)。(3)与模型组比较,各药物干预组LC3-Ⅱ表达均增多(P<0.05, P<0.01),JQHF高剂量组、TMST组、PRE组、RAP组P-mTOR、P-4EBP1表达均减少(P<0.05),JQHF高剂量组、TMST组、RAP组P-P70S6K表达减少(P<0.01)。结论 JQHF可以改善细胞内自噬水平,修复PAN诱导损伤足细胞,与上调细胞内Nephrin、Podocalyxin及LC3-Ⅱ的表达,减少mTOR及相关因子合成有关。
英文摘要:
      
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