密蒙花颗粒剂对去势雄兔泪腺细胞凋亡因子Bax、Bcl-2、Fas和FasL的影响

基金项目:国家自然科学基金面上资助项目（No. 30772824，No. 81574031）；湖南省高层次卫生人才“225”工程培养项目资助；湖南省科技厅科研基金资助项目（No. 2015SF2016-6）；湖南省发展改革委科研基金资助项目（湘发改投资［2014］658号）；长沙市科技计划重大专项（No. K1501014-31）

作者	单位	E-mail
欧阳云,彭俊,谭涵宇
彭清华	湖南中医药大学第一附属医院眼科（长沙 410007）	pqh410007@126.com

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中文摘要:

目的观察密蒙花颗粒剂对去势雄兔泪腺细胞凋亡因子Bax、Bcl-2、Fas和FasL的影响，探讨密蒙花颗粒剂对去势雄兔干眼症模型的疗效。方法将密蒙花原药材制备成颗粒剂。将30只健康成年新西兰长耳白兔（雄性），随机分为空白组（A组），模型组（B组），密蒙花颗粒剂组（C组），安慰剂组（D组），睾酮组（E组）5组，每组6只。除A组外其余4组实验用兔行双侧睾丸及附睾切除术。除A、B组外，从术后第3日开始C组予密蒙花颗粒剂，按100 mg/kg灌胃，3次/日；D组予生理盐水20 mL灌胃，3次/日；E组按2 mg/kg在大腿肌肉处注射丙酸睾酮注射液，每3日注射1次。各组实验用兔，分别于术前和术后第4周各进行1次Schirmer Ⅰ试验（Schirmer Ⅰ test， SⅠT）和泪膜破裂时间（tear break-up time， BUT）测定。用药观察4周后采用空气栓塞法处死各组兔子，摘取双眼泪腺组织，采用免疫组化法对泪腺细胞凋亡因子Bax、Bcl-2、Fas和FasL的表达进行检测，并观察泪腺组织结构形态图。结果（1）SⅠT及BUT结果：与本组术前及术后A组比较，B、D组SⅠT及BUT均明显下降（P<0.01）；与B、D组术后比较，C、E组SⅠT及BUT升高，且差异均有统计学意义（P<0.01）。（2）Bax、Bcl-2、Fas、FasL表达：与A组比较，B、D组Bax、Fas、FasL表达均明显增多，Bcl-2表达明显减少（P<0.01）；与B、D组比较，C、E组Bax、Fas、FasL表达均明显减少，Bcl-2表达明显增多（P<0.01）。（3）Bax、Bcl-2、Fas、FasL表达观察结果： A组：泪腺结构清晰，未见Bax、Bcl-2、Fas、FasL表达；B组：〖JP+1〗泪腺结构模糊，Bax、Fas、FasL均大量表达于细胞膜和细胞浆中，呈棕黄色颗粒，Bcl-2仅少量表达；C组：泪腺结构清晰，散见Bax、Fas、FasL表达，Bcl-2大量表达于细胞膜和细胞浆中，呈棕黄色颗粒；D组：泪腺结构模糊，Bax、Fas、FasL均大量表达于细胞膜和细胞浆中，呈棕黄色颗粒，Bcl-2仅少量表达；E组：泪腺结构清晰，散见Bax、Fas、FasL表达，Bcl-2未见表达。结论密蒙花颗粒剂具有与雄激素相似的抑制泪腺细胞凋亡因子Bax、Fas和FasL表达，同时上调Bcl-2的作用，能抑制雄激素缺乏所致兔泪腺细胞的凋亡，维持泪腺基础分泌量，但其作用弱于雄激素。

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