溃疡性结肠炎湿热证动物模型的建立与评价

目的?建立并评价病证结合溃疡性结肠炎（UC）湿热证小鼠模型。方法?84只c57bl/6j雄性小鼠，随机分为正常组、疾病模型组、双因素造模组、多因素造模组，每组21只。正常组采用普通饲料喂养，自由饮水；疾病模型组采用3%葡聚糖硫酸钠溶液（DSS）自由饮用7天，普通饲料喂养；双因素造模组在疾病模型组基础上叠加14天高脂饲料喂养；多因素造模组在双因素造模组基础上叠加每日8 h的气候箱放置，共14天。在造模期间，每日观察小鼠的证候学评价指标（一般情况、体重、饮水量、腹泻评分），在DSS溶液饮用第3、5、7天观察各组小鼠疾病评价指标[疾病活动指数评分（DAI）、结肠长度、重量、脾重]，并分别用酶联免疫法（ELISA）、酶联免疫组织化学染色法、HE染色方法观察炎症性指标[白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）、小鼠肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、血清钙卫蛋白（SC）、C反应蛋白（CRP）]、黏膜屏障指标[咬合蛋白（Occludin）、闭锁小带蛋白（ZO-1）、β-连环蛋白（β-catenin）、钙黏附蛋白（E-cadherin）]和组织病理学变化，进行病证结合的模型评价。结果?DSS溶液自由饮用叠加高脂饮食和气候箱5天后，多因素造模组与正常组和疾病模型组比较，一般情况较差，饮水量增加，腹泻评分升高、DAI评分升高、结肠长度缩短、结肠重量减轻、脾重增加，IL-6升高、IL-10下降、SC升高、CRP升高，β-catenin表达水平降低（均P<0.05）。HE染色可见结肠黏膜上皮破损，腺体排列紊乱甚至消失，杯状细胞明显减少，固有层中有大量炎性细胞浸润。双因素造模组存活率为85.71%，多因素造模组存活率为90.47%。结论?DSS溶液自由饮用叠加高脂饮食和气候箱可构建病证结合UC湿热证小鼠模型，DSS溶液自由饮用叠加高脂饮食和气候箱5天为构建该模型较理想的方法。

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